VIEW ARTICLE    http://dx.doi.org/10.1094/ASBCJ-2012-0410-01

Rapid Detection of Lactobacillus brevis in Beer Production by the Combination of Microcolony and Fluorescence In Situ Hybridization (FISH). Si Meng, College of Food Science and Technology of Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China; Deliang Wang (1), China National Institute of Food and Fermentation Industries, Beijing 100027; Xiaoyu Liu, College of Food Science and Technology of Huazhong Agricultural University, Wuhan; Yanqing Zhang, China National Institute of Food and Fermentation Industries, Beijing; Liyun Guo, Zhiping Lin, and Fengchao Jia, Technical Research Center of Beijing Yanjing Brewery Group Co. Ltd, Beijing 101300; and Martin Pavlovic, Slovenian Institute of Hop Research and Brewing, Zalskega tabora 2, Zalec 3310, Slovenia. (1) Corresponding author. Phone: (+86) 10-64649991; Fax: (+86) 10-64645959; E-mail: <wdlpost2001@yahoo.com.cn> J. Am. Soc. Brew. Chem. 70(2):91-94, 2012.

In this study, we developed an assay that combines a fluorescent staining microcolony procedure with fluorescence in situ hybridization for the rapid qualitative and quantitative detection and enumeration of spoilage bacteria in brewery process samples. Both quantitative and qualitative data can be gathered using fluorescent microscopy to visualize microcolonies labeled with a species-specific fluorescently labeled probe, and 6-darboxyfluorescein diacetate as a stain. Whereas traditional plating procedures can take up to 7 days, this assay shortens the processing time to 22 hr, while providing comparable rates of detection. The method was developed through testing on a known stock culture of Lactobacillus brevis and validated on brewery production samples. The results show that the method provides sound, rapid, qualitative, and quantitative results that can be applicable in a beer production facility. Keywords: FISH, Fluorescent microcolony, Rapid detection

En este estudio, hemos desarrollado un ensayo que combina un procedimiento de tinción fluorescente de microcolonias con hibridación in situ fluorescente (FISH) para la determinación cualitativa rápida y la detección cuantitativa y recuento de bacterias dañinas a la cervza en las muestras del proceso de cervecería. Tanto los datos cuantitativos y cualitativos se puede obtener mediante microscopía de fluorescencia para visualizar microcolonias marcados con una especie específica de la sonda marcada con fluorescencia, y la CFDA (6-carboxifluoresceína diacetato) como una mancha. Mientras que los procedimientos tradicionales de placas pueden tardar hasta 7 días, este ensayo se acorta el tiempo de procesamiento a 22 horas, mientras que proporciona tasas comparables de detección. El método fue desarrollado a través de pruebas de una cultura de valores conocidos de Lactobacillus brevis y validado con muestras de producción cervecera. Los resultados muestran que el método proporciona rápido y seguro resultados de cualitativos y cuantitativos que pueden ser aplicables en una instalación de producción de cerveza. Palabras claves: FISH, microcolonia fluorescente, la detección rápida