VIEW ARTICLE    http://dx.doi.org/10.1094/ASBCJ-2012-0321-01

Wort Free Amino Nitrogen Analysis Adapted to a Microplate Format (1). Mark R. Schmitt (2) and Allen D. Budde, United States Department of Agriculture–Agricultural Research Service, Cereal Crops Research Unit, 502 Walnut St., Madison, WI 53726. (1) Mention of trade names or commercial products in this publication is solely for the purpose of providing specific information and does not imply recommendation or endorsement by the United States Department of Agriculture. (2) Corresponding author. Phone: 608-262-4480; Fax: 608-890-0302; E-mail: <mark.schmitt@ars.usda.gov> J. Am. Soc. Brew. Chem. 70(2):95-102, 2012.

The standard method for determining wort free amino nitrogen content is a long-established but now relatively outdated procedure, calling for the use of test tubes, marbles, several water baths (boiling and 20°C), manual sample transfers, and a conventional spectrophotometer. Currently, many malting quality laboratories avoid use of this cumbersome manual system by adopting automated chemistry analysis systems as their in-house standard method for wort free amino nitrogen analysis. Several recent papers have taken a somewhat different approach to measuring malting quality by adapting the basic analytical method to microtiter plates, microplate readers, and related instrumentation. This streamlines sample handling and increases sample capacity. However, results from the several free amino nitrogen methods published previously have not been directly compared. In this study, we analyzed several malts using the standard ASBC Wort-12 method, our standard Skalar segmented flow analysis chemistry system, and several variations of those two chemistries in microplate formats to compare the results obtained by the different analysis systems. Among these methods, the results from the manual ASBC Wort-12, the automated Skalar system, and a microplate-format assay based on the Skalar reagents agreed well. Surprisingly, however, direct adaptation of the Wort-12 reagents, times, and temperatures to the microplate format yielded inconsistent results. We examined a number of parameters in the microplate-format Wort-12 implementation but were unable to identify a single factor responsible for the divergence of results. From these results, we recommend adapting the chemistry from the Skalar segmented flow analysis system to a microplate format for analysis of wort free amino nitrogen content.

El método estándar para determinar la libre contenido de nitrógeno amino del mosto es un procedimiento de larga data, pero ha quedado obsoleta relativamente, pidiendo el uso de tubos de ensayo, los mármoles, baños de agua (varios de ebullición y 20°C), las transferencias manuales de la muestra, y un espectrofotómetro convencional. En la actualidad, muchos de los laboratorios de la calidad de maltera evitar el uso de este sistema manual engorroso mediante la adopción de sistemas automatizados de análisis de la química como en la propia método estándar para el análisis de libre nitrógeno amino sin mosto. Varios trabajos recientes han adoptado un enfoque un tanto diferente a la medición de la calidad maltera, adaptando el método de análisis de base a placas de microtitulación, lectores de microplacas, y la instrumentación correspondiente. Esto simplifica el manejo de muestras y aumenta la capacidad de la muestra. Sin embargo, los resultados de los varios métodos de la libre contenido de nitrógeno amino publicados con anterioridad no se han comparado directamente. En este estudio, se analizaron varias maltas utilizando estándar de ASBC método del mosto-12, nuestro estándar de Skalar sistema segmentado análisis de flujo de la química, y algunas variaciones de esos dos procesos químicos en los formatos de microplacas para comparar los resultados obtenidos por los sistemas de análisis diferentes. Entre estos métodos, los resultados de la Hierba de instrucciones ASBC-12, el sistema automatizado Skalar, y un ensayo en microplaca-formato basado en los reactivos Skalar acuerdo bien. Sorprendentemente, sin embargo, la adaptación directa de los reactivos mosto-12, tiempos y temperaturas en el formato de microplacas arrojado resultados inconsistentes. Hemos examinado una serie de parámetros en el formato de microplaca del mosto-12 puesta en práctica, pero no pudieron identificar a un único factor responsable de la divergencia de los resultados. A partir de estos resultados, se recomienda la adaptación de la química de la Skalar sistema segmentado análisis de flujo a un formato de microplaca para el análisis del libre contenido de nitrógeno amino del mosto.